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手性柱的保存方式直接影响其使用寿命与拆分性能,尤其 Daicel 不同类型手性柱(如多糖键合型 IC、蛋白质键合型 AGP、冠醚型 CR (+))因固定相结构差异,保存溶剂选择需精准匹配。本文针对这三类热门型号,梳理保存核心要点与溶剂选择逻辑,助力延长柱效。
一、CHIRALPAK® IC 手性柱:多糖键合型的 “烷烃 - 醇体系” 保存
IC 手性柱作为多糖衍生物键合型手性柱,固定相为硅胶表面共价键合纤维素 - 三 (3,5 - 二氯苯基氨基甲酸酯),需重点避免固定相脱落与溶剂兼容问题:
常规保存溶剂:出厂保存溶剂为正己烷 / 异丙醇(90:10 v/v),适用于正相模式使用后的保存 —— 用该溶剂以 0.5ml/min 流速冲洗 30 分钟,可去除残留流动相与添加剂,维持键合相稳定。
反相模式后特殊处理:若 IC 手性柱用于反相体系(如乙腈 / 水相),保存前需先用水 / 乙腈(60:40 v/v) 冲洗 1 小时去除盐残留,再换用正己烷 / 异丙醇(90:10)平衡,避免水相残留导致固定相溶胀。
禁忌:不可用纯丙酮、氯仿等强极性溶剂保存,会破坏键合结构。
二、CHIRALPAK® AGP 手性柱:蛋白质键合型的 “水 - 异丙醇体系” 保存
AGP 手性柱为硅胶表面共价键合 α1 - 酸性糖蛋白,蛋白质固定相易受温度、盐浓度影响,保存需兼顾活性与防污染:
标准保存溶剂:出厂推荐水 / 异丙醇(85:15 v/v),无论正相或反相模式使用后,均需先用水 / 异丙醇(90:10) 冲洗去除盐与添加剂,再换用 85:15 体系保存 —— 异丙醇可抑制微生物滋生,保护蛋白质活性。
温度配合:短期保存(<1 周)可室温(<30℃)放置,长期保存(>1 周)需4℃冷藏,避免蛋白质变性;且保存前需确保无盐残留,否则盐析出会堵塞柱床。
维护细节:若柱内吸附疏水性杂质,可反接用水 / 异丙醇(75:25) 低流速(0.3ml/min)冲洗过夜,再换保存溶剂平衡。
三、CROWNPAK® CR (+) 手性柱:冠醚型的 “水 - 甲醇体系” 保存
CR (+) 手性柱固定相为硅胶表面涂敷 (S)-18 - 冠 - 6 醚,依赖冠醚环与质子化铵离子的结合作用,保存需规避钾盐与强有机相:
专属保存溶剂:出厂保存溶剂为水 / 甲醇(95:5 v/v),使用后需先用纯水冲洗 1 小时去除高氯酸等酸性流动相,再换用该体系保存 —— 甲醇比例仅 5%,既能防微生物,又不破坏冠醚固定相。
关键禁忌:绝对禁止用含钾盐的溶剂保存(K⁺会竞争性结合冠醚环,导致手性选择能力丧失);也不可用纯甲醇或高比例有机相,会导致涂敷型固定相脱落。
应急处理:若短期无专用保存溶剂,可用纯水临时保存(<3 天),但需每日更换,防止细菌滋生。
四、共性保存要点
过滤与脱气:所有保存溶剂需经 0.22μm 滤膜过滤、超声脱气,避免颗粒与气泡损伤柱床;
堵头保护:取下色谱柱后,立即用专用堵头密封两端,防止空气进入与溶剂挥发;
定期检查:每月需用保存溶剂冲洗 1 次,尤其潮湿环境,避免溶剂分层或变质。
通过针对 IC、AGP、CR (+) 手性柱的固定相特性选择专属保存溶剂,可有效维持其手性选择性与柱效,为后续实验的精准拆分提供保障。
广州绿百草作为 Daicel 大赛璐授权代理商,提供色谱柱选型、方法开发等技术支持,助力客户高效实现手性分离与分析。