技术文章
固相萃取(Solid Phase Extraction, SPE)是一种结合液固萃取与柱色谱技术的样品前处理手段,通过固相吸附剂选择性吸附目标物,实现复杂基质中化合物的分离与富集。其核心在于利用目标物与吸附剂间的特异性相互作用,结合差异化的保留策略,达到纯化或浓缩的目的。以下从基本原理与保留策略两方面解析其工作机制。
吸附:将液体样品通过固相吸附剂(如C18、离子交换树脂等),目标物通过疏水、静电或氢键作用被吸附;
分离:干扰物或基质成分因作用力弱被直接冲走,或通过清洗步骤去除;
洗脱:使用强溶剂(如甲醇、乙腈或缓冲盐溶液)将目标物从吸附剂上释放,完成富集。
该技术可高效处理生物体液、环境水样等复杂基质,适用于痕量分析(如农药残留、药物代谢物检测)。
策略1:通过净化(吸附干扰物)
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原理:固定相选择性吸附干扰物,允许目标物直接通过并收集。
操作流程:
活化吸附剂(如硅胶或离子交换树脂);
上样后,目标物随流动相流出,干扰物被吸附;
直接收集含目标物的流出液。
适用场景:
样品中干扰物浓度显著高于目标物(如食品中色素去除);
目标物稳定性差,需避免接触强洗脱溶剂。
策略2:保留-清洗-洗脱(吸附目标物)
原理:固定相特异性保留目标物,通过清洗去除杂质后洗脱目标物。
操作流程:
保留:目标物被吸附剂捕获(如C18通过疏水作用保留非极性化合物);
清洗:弱溶剂(如水或低浓度甲醇)去除吸附力弱的杂质;
洗脱:强溶剂(如甲醇-乙酸溶液)解吸目标物。
适用场景:
痕量目标物富集(如环境水样中农药检测);
需高纯度提取物的分析(如血浆中药物代谢物分离)。
三、吸附剂与策略的匹配选择
反相吸附剂(C18、C8):适合策略2,通过疏水作用保留非极性目标物(如多环芳烃)。
离子交换树脂(SAX、SCX):适合策略1或2,通过静电作用吸附带电化合物(如核酸、蛋白质)。
混合模式吸附剂(HLB):兼具疏水与离子交换作用,适配复杂样品(如血样中多类化合物同步富集)。
四、应用与优势
环境分析:富集水体中痕量有机污染物(策略2);
食品安全:去除果汁中色素与糖分(策略1);
生物医药:纯化血浆中的药物分子(策略2)。
SPE通过灵活的保留策略与多样化的吸附剂,成为高效、可控的样品前处理工具,显著提升检测灵敏度与分析效率,助力精准分析。