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无需衍生化快速检测20种氨基酸的LC-MS方法

更新时间:2023-03-22点击次数:330

液质联用技术(LC-MS)具有复杂样品分离能力,高灵敏度等优势,目前在药物、食品、质检等行业应用越来越广泛。本应用概述了一种LC-MS/MS方法,用于分析所有20种氨基酸,以往使用高效液相色谱检测氨基酸时,待测样品需要衍生化,且衍生步骤繁琐,操作复杂,耗时较长。本应用特点在于所检测20种氨基酸,均无需衍生化。


色谱条件

色谱柱Super™Carbon LC, 10cm x 2.1 mm I.D, 2.7 μm;

流动相[A]水(0.1% (v/v) 二氟乙·酸(DFA));[B]乙腈(0.1% (v/v) 二氟·乙酸(DFA))

梯度:

image.png

流速:0.2 mL/min;

柱温:12°C;

检测器:MSD;

进样量:1.0 μL;

样品:不同浓度的氨基酸混合物;

稀释剂:水(0.1% (v/v)二氟·乙酸(DFA))


结果

图1. 20种未衍生化氨基酸的HPLC图谱

20种未衍生化氨基酸的HPLC图谱

表1. 20种未衍生化氨基酸的保留时间

20种未衍生化氨基酸的保留时间

表2. 20种未衍生化氨基酸的MS分离条件

20种未衍生化氨基酸的MS分离条件

表3. 20种未衍生化氨基酸MRM裂解参数和离子

 20种未衍生化氨基酸MRM裂解参数和离子


结论

该应用证明了利用LC-MS/MS技术采用对应级别的溶剂和试剂,配合Super™Carbon LC色谱柱,在不需要衍生化试剂的情况下,仍可用于20种氨基酸的检测,避免了衍生化/未衍生化氨基酸的存在以及衍生化试剂本身的干扰,且与大多数商业方法相比,耗时更短。

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