无需衍生化快速检测20种氨基酸的LC-MS方法

液质联用技术（LC-MS）具有复杂样品分离能力，高灵敏度等优势，目前在药物、食品、质检等行业应用越来越广泛。本应用概述了一种LC-MS/MS方法，用于分析所有20种氨基酸，以往使用高效液相色谱检测氨基酸时，待测样品需要衍生化，且衍生步骤繁琐，操作复杂，耗时较长。本应用特点在于所检测20种氨基酸，均无需衍生化。

色谱条件

色谱柱：Super™Carbon LC, 10cm x 2.1 mm I.D, 2.7 μm；

流动相：[A]水(0.1% (v/v) 二氟乙·酸(DFA))；[B]乙腈(0.1% (v/v) 二氟·乙酸(DFA))

梯度：

流速：0.2 mL/min；

柱温：12°C；

检测器：MSD；

进样量：1.0 μL；

样品：不同浓度的氨基酸混合物；

稀释剂：水(0.1% (v/v)二氟·乙酸(DFA))

结果

图1. 20种未衍生化氨基酸的HPLC图谱

表1. 20种未衍生化氨基酸的保留时间

表2. 20种未衍生化氨基酸的MS分离条件

表3. 20种未衍生化氨基酸MRM裂解参数和离子

结论

该应用证明了利用LC-MS/MS技术采用对应级别的溶剂和试剂，配合Super™Carbon LC色谱柱，在不需要衍生化试剂的情况下，仍可用于20种氨基酸的检测，避免了衍生化/未衍生化氨基酸的存在以及衍生化试剂本身的干扰，且与大多数商业方法相比，耗时更短。