技术文章
更新时间:2025-12-03
点击次数:84
手性色谱分析是药物研发、天然产物检测的关键环节,新手常因对原理和柱型特性不熟悉踩坑,导致分离失败或柱效快速下降。
大赛璐授权代理商——广州绿百草 结合 Daicel(大赛璐)手性柱(如 AD-H、OD-H、CR (+) 等)的使用场景,梳理 3 个核心误区及解决方案,助力高效上手。

误区 1:盲目选型,忽略化合物与柱型匹配
新手易凭 “热门型号” 选型(如跟风用 AD-H),却忽略目标化合物结构特性 —— 比如用 AD-H 拆分碱性生物碱,分离度差且峰形拖尾,实则 OD-H 更适配。
Daicel 柱使用建议:
含芳香环、中性 / 酸性化合物→选 CHIRALPAK® AD-H 手性柱(正相)、CHIRALCEL OJ-RH 手性柱(反相);
碱性化合物(胺类、生物碱)→优先 CHIRALCEL OD-H(正相)、CHIRALCEL OD-RH(反相),可加 0.1% 二乙胺抑制吸附;
氨基酸 / 铵盐类→专属 CROWNPAK CR (+) 手性柱;生物样本→ CHIRALPAK AGP 手性柱(蛋白质键合型,生物相容性好)。
误区 2:流动相 / 添加剂使用 “一刀切”
常见错误:
① 用多糖涂敷型( CHIRALPAK® AD-H、 CHIRALCEL OD-H)时加丙酮、氯仿等强极性溶剂,导致固定相脱落;② 给 CROWNPAK CR (+) 手性柱用含钾盐的流动相,破坏冠醚识别位点;③ 随意添加高浓度酸碱,超出柱 pH 耐受范围。
正确操作——
溶剂兼容性:Daicel 多糖涂敷型禁用丙酮、氯仿;AGP 禁用乙醇(会导致蛋白质变性);
添加剂匹配:酸性样品加 0.1% 三氟乙酸(TFA),碱性样品加 0.1% 二乙胺(DEA),CR (+) 柱禁用钾盐;
pH 控制:OD-RH、OJ-RH 等反相柱 pH 需在 2.0~9.0,AGP 柱 pH 4.0~7.0。
误区 3:忽视柱维护,用完直接存放
新手常做完实验不冲洗,或用错保存溶剂(如 AD-H 用纯水保存),导致残留样品吸附、固定相损坏,柱效快速下降。Daicel 柱维护要点:
实验后冲洗:正相柱(AD-H、OD-H)用正己烷 / 异丙醇(90:10)冲 30 分钟;反相柱(OD-RH)用水 / 乙腈(60:40)除盐后再平衡;
保存溶剂:AD-H/OD-H 用正己烷 / 异丙醇(90:10),AGP 用缓冲液(pH 7.0),CR (+) 用 0.1% 高氯酸水溶液;
禁忌:避免长期高温(多糖涂敷型≤40℃)、频繁反接柱子,柱效下降时用专属溶剂冲洗(如 AD-H 用 100% 乙醇)。
遵循 “选型匹配结构 + 流动相适配柱型 + 规范维护” 原则,可大幅降低实验失败率,同时延长 Daicel 手性柱使用寿命,快速掌握手性色谱分析核心技巧。