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糖类分离柱:分离糖类化合物的色谱柱

更新时间:2025-11-08点击次数:57
  糖类分离柱是用于分离糖类化合物的色谱柱,广泛应用于食品、医药、化工等领域的糖类分析。
 
  糖类分离柱的分离原理主要是基于配体交换反应。糖分子上的羟基可被去质子化而带有负电荷,这些负电荷与树脂表面上的金属离子的正电荷之间相互作用,使糖被保留,从而达到分离的目的。
 
  通过填料表面的抗衡离子(如钙、铅)与糖类分子间的吸附与解吸平衡,实现果糖、葡萄糖、蔗糖等单糖、双糖的分离。适用于纯水或稀酸流动相环境,可有效分离糖醇类物质。 ‌
 
  填料特性
 
  常见填料为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,表面键合磺酸基团或钙离子配体,通过尺寸排阻与离子交换机制协同作用,提升分离效率。
 
  样品前处理
 
  溶解于流动相体系,经0.45μm滤膜过滤,去除颗粒物和蛋白质。
 
  离心(转速≥8000rpm,时间10分钟)进一步净化。
 
  进样控制
 
  单次进样量:氨基柱≤20μL(浓度≤20mg/mL),钙离子交换柱≤50μL。
 
  避免过量进样导致色谱峰展宽或固定相过载。
 
  流动相管理
 
  使用前通过0.5μm滤膜过滤,超声脱气≥20分钟。
 
  冲洗管路和进样阀(体积≥10倍管路体积),防止污染。
 
  柱温与流速
 
  柱温:单糖分析30-40℃,多糖分析40-50℃,温度波动≤±1℃。
 
  流速:常规0.8-1.2mL/min,避免柱压过高(氨基柱柱压需<20MPa,钙离子交换柱需<15MPa)。
 
  长期保存
 
  氨基柱:无水有机溶剂(如纯乙腈、异丙醇)封闭,每3个月更换保存液。
 
  钙离子交换柱:含微量防腐剂的保存液,每月冲洗5-10CV后重新密封。
 
  聚合物基质柱:50%甲醇水溶液封闭,保存温度0-10℃。

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