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Daicel 的 CHIRALPAK® AD-H、CHIRALCEL® OD-H 等多糖涂敷型手性柱,长期使用后易因异丙醇残留、样品吸附导致柱效下降(理论板数降、分离度差)。100% 乙醇因极性适中、不破坏涂敷层,是恢复柱效的关键手段,以下为针对 CHIRALPAK® AD-H、CHIRALCEL® OD-H 的正确操作。
一、核心前提:仅适用于多糖涂敷型
100% 乙醇冲洗仅适配 CHIRALPAK® AD-H 手性柱、CHIRALCEL® OD-H 手性柱 等多糖涂敷型,禁止用于 CHIRALPAK® AGP(蛋白质键合型)、CROWNPAK® CR (+)(冠醚型)—— 乙醇会导致蛋白质变性、冠醚层脱落,反而损坏柱效。
二、3 步正确操作(以 4.6mm 内径柱为例)
预处理:清除高危杂质
若用正相(烷烃 / 异丙醇):先以 正己烷 / 异丙醇(90:10)0.5ml/min 冲 20 分钟,去除残留异丙醇与二乙胺;
若用反相(乙腈 / 水):先以 水 / 乙腈(60:40)0.5ml/min 冲 30 分钟,除盐,避免与乙醇析出堵塞柱床。
乙醇冲洗:控速控时
流速:AD-H、OD-H 均用 0.5ml/min(半制备柱按内径换算),柱压不超 30MPa;
时间:室温冲 60 分钟,残留严重(如 OD-H 分离生物碱后)可延至 90 分钟,不超 2 小时。
后续平衡:恢复分析条件冲完用目标流动相平衡:正相分析(如 AD-H 拆芳香族)用 正己烷 / 异丙醇(90:10)0.5ml/min 平衡 30 分钟,复测标准品(AD-H 用联萘酚、OD-H 用麻黄碱),柱效通常恢复至初始 85% 以上。
三、关键注意事项
频率:每月最多 1-2 次,过度冲洗会加速 AD-H、OD-H 固定相老化;
禁忌:若冲洗后柱效仍无改善,需排查硅胶腐蚀(如强碱性溶剂),而非单纯残留问题。
通过以上操作,可低成本恢复 AD-H、OD-H 手性柱效,延长其在药物研发、天然产物分析中的使用寿命。
广州绿百草作为 Daicel 授权代理商,提供色谱柱选型、方法开发等技术支持,助力客户高效实现手性分离与分析。