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尺寸排阻色谱柱具体该如何安装呢?

更新时间:2025-06-17点击次数:39
  尺寸排阻色谱柱是一种广泛应用于生物分析领域的工具,其工作原理主要基于分子大小差异进行分离。利用柱内固定相中孔隙与分子间的物理作用来实现分离。具体来说,聚合物分子在柱子中的孔道中被筛选,较大的分子无法通过尺寸较小的孔道,只有较小的分子才能通过这些孔道,从而实现不同分子尺寸的分离。其优点在于其分离速度快、操作简单、分离效果好。此外,该技术不依赖于分子之间的亲和性或化学性质,因此适用于各种生物大分子,如蛋白质、多肽和核酸等的分离。
  尺寸排阻色谱柱的安装过程:
  1、连接入口端:将色谱柱的入口端与液相色谱仪的泵出口管道牢固连接,一般采用不锈钢管或聚醚醚酮(PEEK)管。连接时要确保管道插入色谱柱入口端足够的深度,并使用合适的扳手拧紧接头,防止泄漏,但注意避免过度用力拧紧而损坏色谱柱入口端的连接部件。可以在接头处适当涂抹密封脂增强密封效果。
  2、安装柱头过滤器:在色谱柱入口处安装柱头过滤器,其作用是防止样品中的颗粒杂质进入色谱柱造成堵塞。将柱头过滤器放置在色谱柱入口端,通过螺纹连接或卡套连接等方式固定在色谱柱上,确保安装方向正确且与色谱柱入口紧密贴合,防止出现死体积过大的情况。
  3、连接出口端:把色谱柱的出口端与检测器的流通池入口连接起来,同样使用合适的管道并保证连接牢固且无泄漏。连接完成后,将柱尾螺母拧紧在色谱柱出口端以确保密封良好。注意不要让任何杂质进入色谱柱内部。
  4、调整色谱柱位置:根据液相色谱仪的结构和使用要求,将安装好色谱柱的流路部分放置在合适的位置。如果有温控要求的色谱柱,需将其安装在温度控制器相应的位置,确保色谱柱能在设定温度下工作。调整时要避免对色谱柱造成碰撞或施加过大外力,防止破坏其内部填料结构。

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