大赛璐手性柱又叫手性色谱柱,是由具有光学活性的单体固定在硅胶或其它聚合物上制成的手性固定相。其通过引入手性环境,使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用,包括氢键、偶极-偶极作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成、特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。
大赛璐手性柱的操作事项主要包括使用前准备、操作条件控制、添加剂使用等。具体如下:
1、使用前准备:色谱柱出厂保存条件为正己烷/异丙醇=90/10,使用时需先用此比例溶剂冲洗色谱柱30分钟,再更换为目标流动相稳定系统至基线平稳。接入色谱柱前,须先用合适的溶剂冲洗流路,避免使用强溶剂如丙酮、氯仿等。色谱柱建议专柱专用,避免混用导致污染或损坏。
2、操作条件控制:根据色谱柱标签上的箭头确定流动相方向,确保正确连接。典型流速为1.0 mL/min,柱压范围应低于15.0 MPa,pH值范围在2~8之间,操作温度建议控制在10~50℃。
3、添加剂使用:为实现较好的手性分离效果,可在流动相中加入合适的添加剂,但需注意添加剂与溶剂的互溶性。
4、维护保养:必须使用色谱级试剂配制流动相,并经0.45μm滤膜过滤及超声脱气处理。样品在进样前需过滤样品溶液,防止杂质进入色谱柱。正相色谱柱在使用含酸/碱添加剂的正相流动相后,需用正己烷/异丙醇=90/10冲洗色谱柱50分钟,然后用此比例溶剂封存。