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使用尺寸排阻色谱柱时,需要注意以下几个关键事项

更新时间:2024-05-23点击次数:61
  尺寸排阻色谱柱是一种广泛应用于生物分析领域的工具,其工作原理主要基于分子大小差异进行分离。利用柱内固定相中孔隙与分子间的物理作用来实现分离。具体来说,聚合物分子在柱子中的孔道中被筛选,较大的分子无法通过尺寸较小的孔道,只有较小的分子才能通过这些孔道,从而实现不同分子尺寸的分离。
  使用尺寸排阻色谱柱时,需要注意以下几个关键事项:
  1、流动相的选择:流动相应根据样品的溶解性来选择,它应与凝胶本身具有相似性,同时要求黏度低,与样品的折光率有较大差异。这样可以确保流动相能够润湿凝胶并防止吸附作用的发生。
  2、进样量控制:对于体积排阻色谱来说,进样量不宜超过柱体积的5%。例如,一根规格为300 x 7.8mm的色谱柱的柱体积约为14mL,因此进样量不应超过700uL。控制适当的进样量是保证分离效果和避免柱子过载的重要条件。
  3、样品的准备:在注入样品之前,需要确保样品已经被适当地溶解并且过滤,以避免固体颗粒或未溶解的物质对色谱柱造成损害。
  4、温度的控制:尺寸排阻色谱通常需要在恒温条件下进行,以保持色谱柱的稳定性和提高分离效率。
  5、色谱柱的维护:使用后应及时清洗色谱柱,以去除残留的样品和流动相,防止柱内发生堵塞或微生物生长。
  6、系统监测:在操作过程中,应密切监控系统压力和检测器响应,以便及时发现任何异常情况并采取相应措施。
  综上所述,通过遵循这些注意事项,可以确保尺寸排阻色谱柱的有效使用,同时也能延长其使用寿命,获得可靠的分析结果。在进行实验前,还应仔细阅读色谱柱的使用说明书,以了解更详细的操作指南和建议。

上一个:尺寸排阻色谱柱其应用是非常广泛的

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