使用尺寸排阻色谱柱时，需要注意以下几个关键事项

　　尺寸排阻色谱柱是一种广泛应用于生物分析领域的工具，其工作原理主要基于分子大小差异进行分离。利用柱内固定相中孔隙与分子间的物理作用来实现分离。具体来说，聚合物分子在柱子中的孔道中被筛选，较大的分子无法通过尺寸较小的孔道，只有较小的分子才能通过这些孔道，从而实现不同分子尺寸的分离。

　　使用尺寸排阻色谱柱时，需要注意以下几个关键事项：

　　1、流动相的选择：流动相应根据样品的溶解性来选择，它应与凝胶本身具有相似性，同时要求黏度低，与样品的折光率有较大差异。这样可以确保流动相能够润湿凝胶并防止吸附作用的发生。

　　2、进样量控制：对于体积排阻色谱来说，进样量不宜超过柱体积的5%。例如，一根规格为300 x 7.8mm的色谱柱的柱体积约为14mL，因此进样量不应超过700uL。控制适当的进样量是保证分离效果和避免柱子过载的重要条件。

　　3、样品的准备：在注入样品之前，需要确保样品已经被适当地溶解并且过滤，以避免固体颗粒或未溶解的物质对色谱柱造成损害。

　　4、温度的控制：尺寸排阻色谱通常需要在恒温条件下进行，以保持色谱柱的稳定性和提高分离效率。

　　5、色谱柱的维护：使用后应及时清洗色谱柱，以去除残留的样品和流动相，防止柱内发生堵塞或微生物生长。

　　6、系统监测：在操作过程中，应密切监控系统压力和检测器响应，以便及时发现任何异常情况并采取相应措施。

　　综上所述，通过遵循这些注意事项，可以确保尺寸排阻色谱柱的有效使用，同时也能延长其使用寿命，获得可靠的分析结果。在进行实验前，还应仔细阅读色谱柱的使用说明书，以了解更详细的操作指南和建议。