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实用方法:解决HPLC分析中出现无峰、小峰或负峰问题

更新时间:2023-04-26点击次数:739

在HPLC分析中,出现无峰、小峰或负峰是常见的问题。这些问题通常是由于实验条件的不当、样品制备方式不当、仪器使用问题、列柱相关问题等原因所引起的。针对此类问题,应该优先考虑解决以下几点:


  1. 检查检测器灯是否亮起。有时候,不能检测到某些组分是因为检测器未开启或者没有正确安装。

  2. 检查泵和积分器之间的连接是否松散或断线。如果连接不紧密可能会导致流量变小或者样品流动不均匀,进而导致无峰、小峰等问题。

  3. 检查泵是否打开,流向是否正确。通常,泵应该流向色谱柱而不是废液。如果泵流向错误,可能会导致无法检测到目标物质,同时也会导致其他各种问题。

  4. 检查样品是否正确。显然,如果样品瓶装错了样品或者样品已经变质,可能会导致超出预期的结果。需要仔细检查样品标签和检查样品是否遇到了外界污染。

  5. 检查溶剂和流动相的组成是否合适。当溶剂和流动相的组成差异很大时,会导致小峰或无峰;当流动相比样品组分对设定的UV波长更具吸收性时,则会诱发负峰,这些情况应该引起充分的注意。


总之,在HPLC分析中出现问题时,请先仔细检查以上几点。如果这些问题都不是原因,那么有可能是某个实验条件可以被进一步优化、样品制备方式可改善,或者是需要手动调整柱温等操作。解决这些问题需要一定的经验和技巧,同时具体的解决方案也需要根据具体的实验情况进行分析处理。


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